Interdiscip Ciencia (Jomput Lite Ciencia ('2 UW) 1: S1-9U DOI: 10.1007 / s 12539-009-0036-7
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Artículo referenciado por Maria Jesús Pita Conde
Luc MONTAGNIER1'2 *, Jamal AISSA1, Stephane FERRIS1, Jean-Luc MONTAGNIER1,
LAVALL Claude & E1 1 (biotecnologías Nanectis, SA 98 rue Albert Calmette, F78350 Jouy en Josas,
Francia) 2 (Vironrx LLC, L. Montagnier 40 Central Park South, Nueva York, NY 10019, EE.UU.)
Recevied 03 de enero 2009 / Revisado 05 de enero 2009 / Aceptado 06 de enero 2009
Resumen: Una nueva propiedad de ADN se describe: la capacidad de
algunas secuencias de ADN bacteriano para inducir las ondas
electromagnéticas en las altas diluciones acuosas. Parece ser un
fenómeno de resonancia provocada por el fondo ambiental
electromagnética de ondas de muy baja frecuencia. El ADN genómico
de bacterias más patógenas contiene secuencias que son capaces de
generar dichas señales. Esto abre el camino para el desarrollo del
sistema de detección de alta sensibilidad para infecciones bacterianas
crónicas en las enfermedades humanas y animales. Palabras clave:
DNA, señales electromagnéticas, las bacterias.
Los microorganismos patógenos en estos días no sólo son sometidos a
alta presión selectiva por las defensas inmunes de sus huéspedes, sino
también tienen que sobrevivir con tratamientos antivirales o
antibióticos de gran actividad. Como era de esperar, han evolucionado
en la búsqueda de muchas formas de escapar a estas condiciones
hostiles, como las mutaciones de resistencia, hipervariabilidad de
antígenos de superficie, los biofilms de protección, la latencia dentro de
las células y tejidos.
Inicialmente se observó (Montagnier y Lavallee, comunicación
personal) de que algunos procedimientos de filtración destinadas a
esterilizar líquidos biológicos pueden producir en determinadas
condiciones definidas al microorganismo infeccioso que se presente
antes de la etapa de filtración. Por lo tanto, la filtración de un
sobrenadante del cultivo de linfocitos humanos infectados con
Mycoplasma pirum, un microorganismo de alrededor de 300 nm de
tamaño, a través de filtros de 100 nm o porosidades 20 nM, produjo al
parecer un líquido estéril. El último, sin embargo fue capaz de
regenerar el micoplasma original cuando se incuban con un micoplasma
cultivo negativo de los linfocitos humanos dentro de 2 a 3 semanas.
Del mismo modo, una filtración de 20 nM no mantuvo una pequeña
fracción infecciosa del VIH, el agente causal del SIDA, cuyas partículas
virales tienen un diámetro promedio de 100-120 nM.
En el curso de la investigación de la naturaleza de tales formas
infecciosas de filtrado, encontramos otra característica de los filtrados,
lo que puede o no estar relacionado con el anterior: su capacidad para
producir unas ondas electromagnéticas de baja frecuencia de una
manera reproducible después de diluciones adecuadas en agua. La
emisión de estas ondas es probable que represente un fenómeno de
resonancia en función de la excitación por el ruido electromagnético
ambiental. Se asocia con la presencia en las diluciones acuosas de
polímeros en nanoestructuras de tamaño definido. El sobrenadante de
las células eucariotas no infectados utilizados como controles, que no
presentan esta propiedad.
En este artículo ofrecemos una primera caracterización de las señales
electromagnéticas (SME) y de sus subyacentes nanoestructuras
producidas por algunas bacterias purificado.
Además de pirum M., una bacteria más clásico, E. i Col, se utilizó para
el propósito del análisis. Las nanoestructuras producida por el VIH será
objeto de otro escrito.
pirum M. es un compañero en forma de célula bacteriana pequeña,
parecida a M. pneumoniae, que pueden ser cultivadas en medio sintético
enriquecido (SP4) (Tully et al., 1977), sino también mutiplies en la
superficie de los linfocitos T humanos.
La cepa (Ber) utilizado en nuestros experimentos fue aislada de un
cultivo de linfocitos T derivados de la sangre de un sujeto
aparentemente sanos (Grau et al., 1993). La adhesión a los linfocitos
micoplasma fuerte está mediada por una adhesina específica, cuyo gen
ha sido clonado y secuenciado por los autores (Tham et al, 1994).
Se utilizó como fuente primaria de los micoplasmas, sobrenadantes de
linfocitos T humanos infectados culturas o de las culturas de la línea de
células T tumor CEM. Todos los cultivos celulares se probaron para la
ausencia de contaminación pirum M. por la reacción en cadena de
polimerasa (PCR) y PCR anidada, antes de comenzar los experimentos.
Los títulos de 106-107 unidades infecciosas / ml de pirum M. se lograron
con facilidad después de 5-6 días de incubación después de la infección
deliberada de los dos tipos de culturas.
Filtración del sobrenadante clarificado se realizó por primera vez en
0,45 [xM (450 nM) Millipore filtros para eliminar los residuos, y
posteriormente en 0,1 | AI (100 nM) o en filtros Millipore 0,02 [xM (20
nM) Whatman filtros, para eliminar las células micoplasma . De hecho,
los dos 100 nM y 20 nM filtrados fueron confirmados estéril al alícuotas
se incubaron durante varias semanas en un medio de Service Pack 4.
búsqueda repetida de rastros de ADN por PCR y por micoplasma PCR
anidada utilizando cebadores específicos para el gen de la adhesina o
para el gen ribosomal 16S fue siempre negativa.
Sin embargo, cuando los filtrados se incubaron durante dos semanas
(100 nM filtrado) o tres semanas (20 nM filtrado) con una cultura de
humanos linfocitos T activados, el micoplasma se recuperó en el medio
con todas sus características originales como los anteriores.
Los filtrados misma se analizaron sólo después de la filtración para la
producción de ondas electromagnéticas de baja frecuencia. Para ello se
utilizó un dispositivo diseñado previamente por Benveniste y Coll (1996;
2003) para la detección de señales producidas por moléculas aisladas
dotadas de actividad biológica. El principio de esta tecnología se
muestra en la figura. 1.
1 3 4
La figura. 1 Dispositivo para la captura y análisis de señales
electromagnéticas (EMS): (1) bobinas: una bobina de alambre de cobre,
impedancia de 300 Ohms, (2) tapón del tubo de plástico que contiene ml
de la solución 1, y se analizaron, (3) del amplificador; (4) Informática
con los programas informáticos.
En resumen, el de 100 nm o 20 nM filtrados sucesivas diluciones en serie
1 de cada 10 (0,1 +0,9 en agua estéril (grado médico). Los primeros 2
diluciones (1 / 10 y 1 / 100) se realizan en el suero libre de medio RPMI,
con el fin de evitar la precipitación de la proteína final en agua
destilada.
Cada dilución se realiza en tubos de 1,5 mL de plástico Eppendorf, que
luego taparlo herméticamente y se agitan fuertemente en un aparato
Vortex durante 15 segundos. Este paso se ha encontrado críticos para la
generación de señales.
Después de todas las diluciones se han realizado (generalmente 15-20
diluciones decimales), los tubos de tapón se leen uno a uno en una
bobina electromagnética, conectado a un sonido preferentemente
accionado por una batería de 12 voltios. Cada emisión se registran dos
veces por 6 segundos, 500 veces amplificadas y procesadas con
diferentes softwares para la utilización de saber de las señales en la
pantalla del ordenador (Fig. 1).
Los armónicos de las principales señales complejas se analizaron
mediante la utilización de varias herramientas de transformación de
Fourier.
En cada experimento, con el ruido interno generado por las diferentes
piezas del sistema de lectura se registró por primera vez (bobina sola, la
bobina con un tubo lleno de agua). muestra el análisis de Fourier (Fig. 2
(c, d)) que el ruido se componía fundamentalmente de frecuencias muy
bajas, probablemente generado al menos en parte por el ambiente 50/60
Hz corriente eléctrica. El uso de la batería de 12 V para la fuente de
poder se reducirá, pero no suprimir este ruido, que se consideró
necesaria para la inducción de las señales de resonancia de lo específico
nanoestructuras.
Cuando diluciones del filtrado pirum M. se registraron para la emisión
de ondas, el primer fenómeno se observó un claro aumento de la
amplitud general de las señales en diluciones determinadas por encima
del ruido de fondo (Fig. 2 (a)) y también un aumento en las frecuencias
(Fig. 2 (b)). Este cambio fue abolida si el tubo de análisis fue colocado
dentro de una caja protegida con láminas de cobre y mumetal (David,
1998).
El análisis de Fourier de las señales pirum M. mostró un cambio hacia
mayores a la frecuencia de 1000 Hz y los múltiplos de la misma. Este
perfil fue idéntica para todas las diluciones que muestra un aumento de
la amplitud (Fig. 2 (c) y 2 (d)).
Las diluciones se baja primero suele ser negativa, mostrando sólo el
ruido de fondo. Las señales positivas se obtuvieron por lo general en
diluciones que van desde 10-5 a 10-8 o 10_ 2. Soluciones más diluidas,
volvieron a ser negativos (Fig. 3).
Las diluciones positivas variaba según el tipo de filtración, el 20 nM
filtrado siendo en general positiva en diluciones superiores a los de los
100 nM filtrado.
La suspensión sin filtrar de origen fue negativo en todas las diluciones,
un fenómeno observado por todos los microorganismos estudiados.
El tamaño y la densidad de las estructuras que producen las señales en
las diluciones acuosas:
Se toma una alícuota del filtrado 20 nM en capas en la parte superior de
un 5-20% (w / v) gradiente de sacarosa en agua y se centrifuga durante
2 horas a 35.000 rpm en un cubo de rotor de giro. Estas condiciones
habían sido previamente utilizado para obtener el equilibrio de la
densidad de las células intactas micoplasma que se formó una fuerte
consolidados a 1,21 de densidad. Las fracciones se obtuvieron de la
parte inferior de los tubos, agrupación de 2 por 2 y se analiza para la
emisión de la señal.
La figura. 4 muestra que la señal que emiten las estructuras fueron
distribuidos en una amplia gama de densidades de 1,15 a 1,25 y también
tenía un alto coeficiente de sedimentación.
fig 2 Detección de EMS de una suspensión de pirum Mycoplasma: A la izquierda: el ruido de fondo
(de una suspensión sin filtrar o una dilución baja negativo). A la derecha: señal positiva (a partir de
una alta dilución D-7 (10-7)). (Un registro) real (2 segundos de una grabación 6 segundos) después de
WaveLab (Steinberg) el tratamiento, (b) análisis detallado de la señal (escala en millisecondes), (c)
Matlab 3D transformada de Fourier análisis (abscisa: 0-20 kHz , ordenada: intensidad relativa, la
dimensión 3D: la grabación en diferentes momentos); Las frecuencias se visualiza en colores
diferentes (d) Sigview transformada de Fourier: nota de los armónicos de nuevo en el rango de 1 000-
3 000 begin_of_the_skype_highlighting 1 000-3 000 end_of_the_skype_highlighting Hz.
La figura. 4 centrifugación de densidad de sucrosa (35000 rpm, 2 hora) de un X 0,02 | filtrado de
suspensión pirum Mycoplasma. Las fracciones recogidas se agruparon 2 por 2 y se diluye hasta D-15
y la prueba del SME. Las barras indican las fracciones positivas para EMS.
A continuación, se dirigió a una bacteria más clásico, E. Coliy utilizando
la cepa de laboratorio Kl.
Una cultura de E. Coli en agitación (oxigenada) las condiciones, cedió
109 unidades de bacterias / ml, medidos por espectrometría La
suspensión se centrifugó a 10.000 rpm durante 15 minutos, el
sobrenadante fue filtrado en filtro de 450 nm y el filtrado resultante se
vuelve a filtrar en un filtro de 100 nm. El filtrado final se encontró
estéril, cuando se siembran en un medio de agar nutritivo y se analizó
para la emisión de ondas electromagnéticas, como se describe más
arriba para H, pirum. diluciones de señal produciendo por lo general
van de 10-8 a 10-12, con perfiles en la transformación de Fourier,
similares a los de M. Pirum (Fig. 5). En un experimento, algunos muy
altas diluciones fueron positivas, que van desde 10_9 de 10-18. Una
alícuota del sobrenadante filtrado no mostró señales por encima de
fondo hasta la dilución 10-38, lo que indica una vez más la importancia
crítica de la etapa de filtración para la generación de señales específicas.
La única diferencia con M, pirum fue que ninguna señal apareció
después de la filtración en filtros de 20 nM, lo que sugiere que las
estructuras asociadas a las señales fueron retenidos por los filtros y, por
tanto, tenía un tamaño superior a 20 nM y por debajo de 100 nM.
A continuación, preguntó por qué las diluciones bajas, lo que
lógicamente debería contener un mayor número de estructuras que
producen la señal, se "silenciosa". Cuando añadimos 0,1 mL de una
dilución negativos bajos (por ejemplo, 10_3) a 0,4 ml o mL de una
dilución positiva 0,9 (10_s), esta última pasó a ser negativa. Esto indica
que el "silencio" diluciones bajas son auto-inhibidor, probablemente
por la interferencia de las múltiples fuentes que emiten en la misma
longitud de onda o ligeramente fuera de fase, como una interferencia de
radio. Por otra parte, la abundancia de nanoestructuras pueden formar
un gel en el agua, por lo que se impide a vibrar. -La evidencia de
homologa "charla cruzada". entre las diluciones
A continuación, se preguntan si era o no posible para generar nuevas
señales que emiten las estructuras de tubo a tubo mediante la
transferencia de onda. El siguiente experimento
La figura. 5 EMS de E, coli 0,1 [i filtrado. positiva por parte de dilución D-8 a D-ll EMS: (a) de
grabación real, (b) el análisis de milisegundos; (c) análisis de la transformada de Fourier Matlab, (d)
análisis de la transformada de Fourier SigView, NF: sin filtro,
que se repitió en varias ocasiones demostró que, efectivamente, éste era
el caso.
Un tubo de donante de una baja "silenciosa" de dilución de E. Coli (10)
se colocó al lado de cerca de un tubo receptor de los terminales positivo
"fuerte" mayor dilución de la misma preparación (10_9). Ambos tubos
se colocaron en una caja mumetal durante 24 horas a temperatura
ambiente, de modo que los tubos no estaban expuestos a ruido
electromagnético externo, y sólo se expone a las señales generadas por
las estructuras presentes en los propios tubos.
Los tubos se leyeron luego otra vez por la señal de detección de
dispositivo: el tubo de donantes todavía estaba en silencio, sin embargo,
el tubo receptor se convirtió también en silencio.
Por otra parte, cuando otras diluciones se hicieron desde el tubo
receptor (IO-10, 1010 ~ 12), estas diluciones se había convertido en
positivo (Fig. 6). Estos resultados sugieren que el tubo receptor se hizo
en silencio por la formación de un exceso de nanoestructuras nuevos,
que pueden emitir señales a diluirse.
La figura. 6 Diafonía entre las diluciones (de un 0,1 E. Coli | x filtrado), véase la explicación en el
texto.
Este efecto fue suprimido mediante la interposición de una vaina de
mumetal entre los dos tubos durante el período de contacto 24 horas,
apuntando a una función de ondas de baja frecuencia en el fenómeno.
La emisión de señales electromagnéticas similares se observó también
con algunas otras especies bacterianas como: B Streptococcus,
Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeroginosa, Proteus mirabilis,
sub-tilis Bacillus, Salmonella, Clostridium perfringens, todos en el
mismo rango de diluciones observado para E . Coli, y sólo después de la
filtración a 100 nm (y no a 20 nM).
Es importante destacar que el efecto de transferencia entre dos tubos,
uno en silencio, una voz alta, se observó sólo si ambas diluciones
contenidos de la misma especie bacteriana. En otras palabras, un tubo
de donantes aureus sólo podía "hablar" con un tubo receptor que
contiene una dilución aureus, y no con un tubo de Streptococcus o E.
Coli, y recíprocamente.
Estos resultados indican que el efecto de transferencia está mediada por
las señales propias de cada especie, las frecuencias de los cuales.....
Por último, dos problemas de los demás se han investigado en el sistema
de E. Coli: el primero fue el papel del número inicial de células
bacterianas en la inducción de las estructuras de producción de la señal
filtrables. Para esta cultura una estacionaria de E. coli fue contada y
ajustado a 109 células / ml y diluciones en serie 100 a 100 se realizaron a
1 CEU / mL. Cada dilución fue filtrada a 100 nM y después se analizan
para las emisiones de la señal. Sorprendentemente, el rango de
diluciones positivas no eran estrictamente dependiente de la
concentración inicial de células de E. Coli, es aproximadamente la
misma a partir de 109 células de hasta 10 células, lo que sugiere que el
mismo número final de nanoestructuras se alcanzó en todas las
concentraciones. Así, paradójicamente, 10 células están dando las
mismas señales de 109 células.
También nos preocupaba por la posible influencia personal del
operador en la lectura.
Para abordar este punto, dos operadores sanos se les pidió para medir
de forma independiente las diluciones misma de E. Coli, cada uno con
desconocimiento de los resultados de los demás. Los resultados de sus
lecturas eran idénticos.
Además, los resultados fueron independientes de la orden en el que las
muestras fueron leídas, ya sea en forma descendente a partir de las
diluciones más bajas hasta las más altas o en las diluciones ascendente
desde el más alto al más bajo.
Por último un trabajador de otro laboratorio coloca las muestras
diluidas en un orden aleatorio, las etiquetas que se desconoce de la
persona que lee las muestras. El mismo rango de diluciones positivo fue
detectado de nuevo siempre y cuando cada tubo estaba bien separada de
la otra, para evitar su "interferencia".
También encontramos que los resultados también fueron
independientes de la ubicación del lugar de la lectura: a partir de la
misma preparación sin filtrar de E. diluciones Coliy positiva de los
filtrados se encontraron a ser el mismo en dos lugares diferentes en
Francia (en el centro de París y suburbios) , una en Canadá (Montreal),
y uno en Camerún (Yaundé).
Como se muestra en las figuras, el ruido de fondo era variable, de
acuerdo con el ion ritmo y momento de registro. En general fue mayor
en las ciudades grandes que en las áreas de los aislados. Sin embargo,
las señales positivas siempre claramente diferenciar sobre el fondo de
picos de frecuencia más alta.
Naturaleza de las nanoestructuras acuosa:
Los tratamientos por RNAseA (Promega, 1 (ug / ml, 37 ° C 1 h),
ADNasa I (Invitrogen, 10 U / DNA [Ag, 37 ° C, h 18), lisozima (Fisher, 1
mg / ml, 37 ° C 10 min), la proteinasa K (Promega, 0,12 mg / ml, en 1%
de sodio dodecil sulfato, 56 ° C 1 h) no suprimió la actividad de
producción de la SAA "fuerte" diluciones ni activar el "silencio"
diluciones.
Sin embargo, la calefacción a 70 ° C durante 30 min suprimido irreversiblly
la actividad, así como la congelación hizo durante 1 hora a -20
° C o -60 ° C. DMSO (10%), y formamida (10%) no tuvieron efecto.
El tratamiento con cationes de litio, con efecto sobre el enlace de
hidrógeno de las moléculas de agua, fue capaz de reducir la intensidad
de las señales, mientras que el rango de las diluciones positivas se ha
mantenido sin cambios.
Naturaleza de las moléculas bacterianas en el origen de
las nanoestructuras:
En experimentos preliminares, se había observado un tailandés de
pretratamiento de una suspensión de E. Coli por el formaldehído% \ no
alteró su capacidad de inducir las señales electromagnéticas, y matan a
las bacterias. Este tratamiento altera las proteínas de superficie de las
células bacterianas sin atacar su material genético, el ADN es decir, de
doble hélice. Esto sugirió que la fuente o: las señales puede ser el propio
ADN.
De hecho, el ADN extraído de la suspensior bacteriana por método fenol
clásica: Técnica de cloroformo fue capaz en la filtración y las diluciones
adecuadas en el agua emiten tc EMS similares a los producidos por las
bacterias intactas en las mismas condiciones. DNAsa tratamiento de la
solución de ADN extraído suprime su capacidad para emitir señales, a
condición de que las nanoestructuras anteriormente por el ADN se
destruyen. Un experimento typica se describe como sigue:
E. Coli ADN fue tratado con proteinasa K en presencia de SDS (dodecil
sulfato de sodio) y furthei desproteinizado por la mezcla de fenolcloroformo.
El Pel....................
et obtenida por precipitación etnanol fue resuspenaea n Tris 2.10 M, pH
7,6 y una alícuota se diluyó 1 / 100 de agua n. La dilución (10_2) fue
filtrada primero a través de i filtro de 450 nm y el resultado fue
entonces filtrado de relleno ed de nuevo en un filtro de 100 nm. El
filtrado se liluted más en diluciones seriadas decimales en el agua como
ya lescribed.
En cuanto a los microorganismos intactos, la etapa de filtración del vaso
observado que es esencial para la detección de la EMS en diluciones de
ADN que él. En su ausencia, no hay señales se podían letected en
cualquier diluciones.
En contraste con la suspensión de microorganismos, donde, se supone
que la filtración mantener las células intactas,. Que la filtración a 100
nM no se mantuvo en el ADN, que vas aún presentes en el filtrado,
medida por lensity óptica Sin embargo, la filtración con un 20 nM
Whatman litros conservado las nanoestructuras que emiten el SME, lo
que sugiere que ellos tienen el mismo rango de tamaños que,
procedentes de la manguera de bacterias intactas.
En el caso del ADN, el papel de la filtración de 100 nM s probablemente
para disociar la red de nanoestructuras srganized en un cristal líquido
gelatinoso en el cono de alta en-cationes en el agua, lo que permite su
dispersión en lilutions más. Como se muestra en la figura. 7, las
diluciones positivas para 5MS estaban en el mismo rango que los
observados para. Que las bacterias intactas, generalmente entre 10-13
10a.
Pig. 7 eSect DNAsa en la producción de EMS. La ADNasa tratados E Coli solución de ADN y el ADN
se diluyen sin tratar de D-2 a D-15. Anâlisis del SME como se describe en la figura. 5. D-2 de dilución
(en negativo para EMS) se muestra como control. DB es positivo para EMS (de un rango de
diluciones positivas D-8 a D-ll). Tenga en cuenta la desaparición de la señal en la DNAsa
En la alta dilución de 10, los cálculos indican que no existe una molécula
de ADN de MW más de 10 en la solución, lo que hace improbable que el
SME se producen directely por el propio ADN, pero más bien por la
auto-inducido por el nanoestructuras de ADN .
En general, todas las especies bacterianas demostrado ser positivos para
EMS dio también positivo para las preparaciones de ADN EMS. Nueva
demostración de que el SME producidos por las bacterias provienen de
su ADN se demostró con su desaparición después de tratamiento que
DNAsa.
Esta inactivación sin embargo, sólo se completa cuando las
nanoestructuras inducida en la solución de ADN que a su vez son
resistentes a la DNasa antes estaban totalmente destruidos.
Esta destrucción se obtengan por la congelación de la solución de ADN a
- 20 ° C durante 1 hora o calentarlo a 90 ° C durante 30 minutos.
Después de un enfriamiento lento para permitir que el ADN se calienta
hasta volver a recocer, DNAsa 1 en una concentración final de 10 U / (xg
de ADN ha sido añadido y la mezcla se incubó a 37 ° C durante 18 horas
en presencia de 5 mM de MgCl2. una alícuota de la solución de ADN se
mantuvo sin tratamiento como control positivo.
La preparación DNAsa tratados se encontró
completamente desprovisto de emisión rJMb en cualquier dilución (rig.
i).
El tratamiento de la solución de ADN por una enzima de restricción
actuando en muchos sitios de E. Coli ADN (EcoRV) no inhibe la
producción de EMS, lo que sugiere que esta emisión está vinculada a las
secuencias más cortas o se asocia con secuencias raras.
Naturaleza de las secuencias de ADN en el origen del
SME:
Una encuesta no exhaustiva de las especies bacterianas y de su ADN
capaz de mostrar EMS sugiere que la mayoría de las bacterias
patógenas para los seres humanos pertenecen a esta categoría
Por el contrario, probióticos "buenas" bacterias como Lactobacillus y
su ADN son negativos para la emisión de EMS.
En el caso de E. Coli, encontramos que algunas cepas utilizadas para
llevar a plásmidos de clonación de genes también fueron negativos (Fig.
8).
Esto sugirió que sólo algunas secuencias de ADN están en el origen del
SME.
Como patogenicidad se asocia a menudo con la capacidad del
microorganismo de obligar a las células eucariotas, células de la mucosa
y en particular, nos centramos nuestro análisis de ADN de nuevo para
pirum M., donde un solo gen (adhesina: 126-kDa proteína) es
responsable de la adhesión de el mi-r, n'nlfl «tn MFL levantamiento
humano
La figura. 8 EMS producido por el fragmento de 1,5 kb de la adhesina de ADN de M, Pirum. El ADN
plásmido que contiene el fragmento de 1,5 Kb fue utilizado para transformar una E, el vector Coli,
XLlblue. El ADN total fue extraído y diluido para el análisis de EMS. A la izquierda: control de
ruido de fondo de una dilución negativa (D-2). A la derecha: señal positiva en D-10 (rango de D-9 y
D-12). Abajo: Nota de la falta de EMS producida por el ADN extraído de la cepa transformada por el
plásmido solo.
1 su gen ha sido clonado y secuenciado en nuestro laboratorio (Tham et
al, 1994). El ADN clonado existido como dos fragmentos de dos
plásmidos, que corresponden respectivamente a la terminal N (1,5 kbp)
y la terminal C (5 kbp) de la proteína.
Los dos plásmidos (SK pBluescript, Stratagene) que contiene los
fragmentos de ADN se amplificaron en una cepa de E. Coli, XLlblue.
El ADN de la cepa de E. Coli (con o sin el plásmido) por sí sola no
bastaba para EMS en cualquier diluciones.
Por el contrario cuando la cepa se transformó con cualquiera de los
plásmidos un fragmento del gen adhesina, EMS se produjeron (Fig. 8).
Los dos fragmentos de ADN adhesina se cortaron por enzimas de
restricción específicas (N terminal: 1,5 kbp / Spel-EcoRI) (Terminal C:
5 kbp / Hindlll-Xbal) y aisladas por electroforesis en gel de agarosa al
0,8%. Cada fragmento de ADN era capaz de inducir EMS (no
mostrados).
También purificada una gran parte del ADN del micoplasma adhesina
toda ADN genómico utilizando cebadores específicos y amplificación
por PCR.
De nuevo este fragmento inducida EMS, lo que indica que ningún ADN
contaminante procedente del plásmido realizado por E. Coli se trate (no
mostrados).
Discusión
Hemos descubierto una nueva propiedad del ADN, que es la capacidad
de algunas secuencias que emiten ondas electromagnéticas en
resonancia después de la excitación por el fondo electromagnética
ambiente.
Debido a la baja sensibilidad y especificidad de nuestra captura y
análisis de señales, las frecuencias emitidas son todos iguales,
independientemente de las especies bacterianas involucradas.
Sin embargo, los experimentos de transferencia de información a través
de tubos plásticos sugieren que, al refinar el análisis y la eliminación de
la variabilidad de las señales interesantes, podemos detectar las
diferencias específicas entre especies, e incluso entre las secuencias. De
hecho, esta propiedad puede ser de carácter general comunes a todas las
AND de doble hélice, incluyendo el ADN humano.
Pero en nuestras condiciones de detección, que parece estar asociada
con solamente algunas secuencias bacterianas.
Queda por verse si se limitan a algunos genes implicados en
enfermedades.
Los experimentos que se haya declarado en efecto indican que esta
detección se aplica también a la escala del cuerpo humano: hemos
detectado la misma EMS en el plasma y en el ADN extraído del plasma
de los pacientes que sufren de Alzheimer, enfermedad de Parkinson, la
esclerosis múltiple y artritis reumatoide Artritis. Esto sugiere que las
infecciones bacterianas están presentes en estas enfermedades.
M o nunca, EMS se pueden detectar también de los virus de ARN, como
el VIH, virus de la gripe A, virus de hepatitis C. En estos casos, la
filtración óptima para la detección o Mo requerirá la previa filtración
zu nlvl sugiriendo la …...
alfombra son nanoestructuras producido más pequeñas que las
producidas por ADN bacteriano.
En los pacientes infectados con el VIH, EMS puede ser detectado sobre
todo en los pacientes tratados con terapia antirretroviral, y con una
carga viral muy baja en el plasma. Estas nanoestructuras que persiste
en el plasma puede contribuir a la reserva viral que escapa al
tratamiento antiviral, suponiendo que llevan la información genética del
virus.
La naturaleza física de las nanoestructuras que apoyan la resonancia
EMS está por determinar.
Se sabe por los estudios de difracción muy temprano de rayos X del
ADN, las moléculas de agua que están estrechamente asociados con la
doble hélice, así como cualquier principiante en la biología molecular
sabe que el ADN en una solución de agua forma geles de asociar a un
mayor número de moléculas de agua.
Por otra parte, una serie de estudios físicos han informado de que las
moléculas de agua pueden formar largos polímeros de dipolos asociados
por puentes de hidrógeno (Ruan et al, 2004; Wer-net et al, 2004).
Sin embargo, estas asociaciones parecen ser muy corta (Cowan et al,
2005). ¿Podrían vivir más tiempo, ser auto-gestionada por las
radiaciones electromagnéticas que emiten como se ha postulado por Del
Giudice, Preparata y Vitielo (1988)?
Se ha estudiado la descomposición con el tiempo de la capacidad de las
diluciones de emisión de EMS, después de haber sido eliminados (en
cajas mumetal) por la exposición a la excitación por el fondo. Esta
capacidad dura por lo menos varias horas, un tiempo máximo de 48
horas, lo que indica la estabilidad relativa de las nanoestructuras.
Si es este último lo suficientemente específica de secuencias de ADN
para poder llevar a cierta información genética?
Si es así, lo que podría ser su papel en la patogenicidad, en particular en
la génesis de las enfermedades crónicas?
Otros estudios que implican la colaboración estrecha entre los físicos y
los biólogos son, evidentemente, necesarias para resolver estos
problemas.
Agradecimientos Agradecemos a la Dra. A. Blanchard para el
regalo de pirum Mycoplasma ADN y los doctores D. Guillonnet, Olivier
R., L. Thibodeau y J. Varon de debate útil.
Referencias
[1] Benveniste, J., Jurgens, P., A'issa, J. 1996. La grabación digital y
transmisión de la señal colinérgica. FASEB Journal 10, A1479.
[2] Benveniste, J., Guillonnet, D. 2003. Método, sistema y dispositivo
para producir las señales de una sustancia biológica y / o actividad
química. Patente de EE.UU. N ° 6541, 978 Bl.
[3] Cowan, ML, Bruner, BD, Huse, N., Dwyer, JR, Chugh, B.,
Nibbering, ET, Elsaesser, T., MiUer, RJ 2005. Ultrafast pérdida de la
memoria y la redistribución de energía en la red de enlaces de
hidrógeno de H2O líquido. Naturaleza 434, 199-202.
[4] David, J. 1998. Introducción al Magnetismo y Materiales
Magnéticos. CRC Press. 354.
[5] DelGuidice, E., Preparata, G., Vitielo, G. 1988. El agua como un país
libre láser dipolo eléctrico. Physical Review Letters 61, 1085-1088.
[6] Grau, O., Kovacic, R., Griffais, R., Montagnier, L. 1993. Desarrollo
de un ensayo de reacción de polimerasa en cadena selectivo y sensible
para la detección de Mycoplasma pirum. FEMS Cartas Microbiología
106, 327-334.
[7] Ruan, CY, Lobastov, VA, Vigliotti, F., Chen, S.,
Zewall, A.H. 2004. Ultrafast cristalografía de electrones de agua facial
cosas. Ciencia 304, 80-84.
[8] Tham, TN, Ferris, S., Bahraoui, E., Canarelli, S., Montagnier, L.,
Blanchard, A. 1994. Caracterización molecular del gen de la adhesina
Pl-HKE de pirum Mycoplasma. Journal of Bacteriology, 781-788.
[9] Tully, JG, Whitcomb, RG, Clark, HF, Williamson, DL 1977.
Micoplasmas patógenos: cultivo y vertebrados patogenicidad de una
nueva espiroplasma. Ciencia 195, 892-894.
[10] Wernet, P., Nordlund, D., Bergmann, U., i Caballero, M., Odelius, M.,
Ogasawara, H., Naslund, LA, Hirsch, los conocimientos tradicionales,
Ojamae, L., Glatzel, P ., Pettersson, LG, Nilsson, A. 2004. La estructura de
la primera capa de coordinación en el agua líquida. Ciencia 304, 995-999.
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